由于雙疫情在全世界持續(xù)肆虐，作為專業(yè)名詞的“核酸檢測”業(yè)已家喻戶曉。對于牧場來說，非瘟檢測也已經(jīng)成為豬場生產(chǎn)管理中的一部分，而核酸提取技術(shù)，作為實驗室檢測環(huán)節(jié)的第一步，相關(guān)產(chǎn)品的選擇也是頗受重視。當(dāng)前高效又便捷的核酸提取產(chǎn)品的廣泛使用，是經(jīng)過眾多科學(xué)家和團(tuán)隊不斷探索的結(jié)晶。那么，有哪些核酸提取產(chǎn)品我們可以在牧場檢測過程中使用呢？小編今天跟大家簡單聊一聊。

核酸提取技術(shù)的發(fā)展

1869年，瑞士科學(xué)家F. Miescher利用胃蛋白酶粗提液消化膿血白細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)了除蛋白質(zhì)之外的新物質(zhì)，當(dāng)時命名為“核素”，這也是首例提取出的粗糙DNA；1889年，R. Altmann發(fā)現(xiàn)“核素”pH呈酸性后，正式命名為核酸；1948年，Chargaff使用檸檬酸鈉和RNase獲得了具有天然性狀的DNA；1957年，Kirby利用酚氯仿異戊醇抽提法提取DNA；Marmur于1961年創(chuàng)建了SDS提取法；1979年，Chirgwin創(chuàng)立了異硫氰酸胍法提取RNA，這也是Trizol法提取RNA的基礎(chǔ)。

在眾多前人研究的基礎(chǔ)上，隨著各科研團(tuán)隊和生物試劑公司繼續(xù)對核酸提取方法進(jìn)行研發(fā)和創(chuàng)新，以及對吸附核酸新材料（硅膠柱、磁珠）的研究和應(yīng)用，才有了目前市面上主流的柱式法核酸提取試劑盒和磁珠法核酸提取試劑盒。隨著自動化提取儀研發(fā)的不斷開展，又分別出現(xiàn)了磁珠法核酸提取儀和柱式法核酸提取儀。磁珠法核酸提取儀憑借其提取通量高、提取快速、操作簡便、性價比高等特點已成為主要的核酸提取方法之一。而柱式法核酸提取儀（需包含機(jī)械臂、吸液系統(tǒng)、離心系統(tǒng)等）受限于提取通量偏低、儀器成本高等原因，導(dǎo)致其市場占有率較低。所以，磁珠法機(jī)提試劑盒、柱式法手提試劑盒、磁珠法手提試劑盒是豬場檢最常用的三種病毒核酸提取試劑盒。

三種病毒核酸提取試劑盒的區(qū)別

1. 磁珠法機(jī)提試劑盒（也叫預(yù)分裝試劑盒）

優(yōu)點：自動化程度高，提取通量高，提取快速，滿足不同提取通量的需求（16位、32位、48位、64位、96位、192位等）。

缺點：不適用于小量樣本的提取，提取通量相對固定，不夠靈活，單條預(yù)分裝耗材成本較高，全自動提取儀器價格較貴。

主要應(yīng)用場景：適用于樣本量較大的實驗室。如果樣本量不足8例，或者預(yù)分裝試劑盒提取后只剩余幾例樣本，用預(yù)分裝試劑盒就會造成試劑浪費，單條預(yù)分裝試劑盒的價格又相對較高，此時，手動提取的方式就會發(fā)揮重要作用。

2. 柱式法手提試劑盒

優(yōu)點：提取通量靈活，操作簡便，單個樣本提取時間<15min，核酸純度高。

缺點：不適用于大量樣本的提取，需要用到高速離心機(jī)。

主要應(yīng)用場景：適用于樣本量較小的實驗室。

3. 磁珠法手提試劑盒

優(yōu)點：提取通量非常靈活，操作簡便，無需使用高速離心機(jī)，所需器材只是簡單的磁力架，磁力架品質(zhì)差異較大，應(yīng)選擇磁力較大高品質(zhì)產(chǎn)品。

缺點：不適用于大量樣本的提取，對操作熟練度有一定的要求。

主要應(yīng)用場景：適用于樣本量較小的實驗室。

在這三種試劑盒中，大多數(shù)實驗室都采用“預(yù)分裝+手提”的組合進(jìn)行核酸提取。手提試劑盒雖然提取通量低，但提取通量靈活，適用于小量樣本的提取，在這個組合中起到了重要的“打補(bǔ)丁”的作用。豬場檢測最常用的手提試劑盒是柱式法，而磁珠法手提試劑盒占有率較低。這可能與實驗人員對這種方法了解較少以及各生物試劑公司推廣較少有關(guān)。其實，相較于柱式法，磁珠手提試劑盒有著比較明顯的優(yōu)勢：在保證高提取靈敏度、操作靈活簡便的基礎(chǔ)上，只需要使用磁力架，不需要使用高速離心機(jī)，操作更為簡便快捷。這也就使得磁珠手提試劑盒具有更廣泛的應(yīng)用場景。

參考文獻(xiàn)

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[5] Marmur J. A procedure for the isolation of deoxyribonucleic acid from micro-organisms[J]. Journal of molecular biology, 1961, 3(2): 208-IN1.

[6] Chirgwin J M, Przybyla A E, MacDonald R J, et al. Isolation of biologically active ribonucleic acid from sources enriched in ribonuclease[J]. biochemistry, 1979, 18(24): 5294-5299.